›
›

Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật - Bài 4: Kỹ thuật phân tách tế bào động vật - Phan Lữ Chính Nhân

Phương pháp gắn với chất
nền mang ái lực (affinity
solid matrix): hạt, bề mặt,
lưới,…
Đặc điểm sinh lí,
sinh hóa bề mặt tế bào
Phương pháp tách tế bào
được kích hoạt bằng hạt
huỳnh quang (FACS)
Phương pháp tách tế bào
được kích hoạt bằng hạt có
từ tính (MACS) 

pdf 50 trang thiennv 09/11/2022 4260
Download
Bạn đang xem 20 trang mẫu của tài liệu "Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật - Bài 4: Kỹ thuật phân tách tế bào động vật - Phan Lữ Chính Nhân", để tải tài liệu gốc về máy hãy click vào nút Download ở trên.

File đính kèm:

  • pdfbai_giang_nuoi_cay_te_bao_dong_vat_bai_4_ky_thuat_phan_tach.pdf

Nội dung text: Bài giảng Nuôi cấy tế bào động vật - Bài 4: Kỹ thuật phân tách tế bào động vật - Phan Lữ Chính Nhân

  1. Phương pháp ép nhuyễn Ép nhuyễn mô: dùng 2 phiến lame ép chặt mảnh mô để thu tế bào đơn đối với những mô có liên kết yếu.
  2. Phương pháp tách bằng màng lọc Tách bằng màng lọc tế bào (Cell strainer): kích thước lỗ trên màng từ 70–100 µm, chỉ cho những tế bào đơn có kích thước tương ứng qua màng.
  3. Tách mô thành tế bào đơn bằng enzym Trypsin Clolagenase Elastase Pronase Dispase
  4. Lắng đồng tỉ trọng (Isopiknic Sedimentation)
  5. Phương pháp ly tâm theo gradient tỉ trọng
  6. • “Tế bào quan tâm là tế bào a. Tế bào này nằm trong 1 khối mô rắn cùng với 3 loại tế bào khác là b, c và d. Các tế bào có tỉ trọng như sau: a = 1,070 g/cm3, b = 1,077 g/cm3; c = 1,067 g/cm3, d = 1,080 g/cm3”.
  7. • c = 1,067 g/cm3 > a = 1,070 g/cm3 > b = 1,077 g/cm3 > d = 1,080 g/cm3
  8. • V(t): Vận tốc lắng của tế bào • R: bán kính của tế bào • a: gia tốc ly tâm của máy • p(s): tỉ trọng tế bào • p: tỉ trọng của môi trường • µ: độ nhớt của môi trường
  9. Li tâm rửa (Centrifulgal Elutriation)
  10. CD (Cluster of differentiation) • Marker bề mặt tế bào • Có hơn 300 loại CD (người) • Ví dụ:
  11. Gắn kết miễn dịch (Immune panning)
  12. Tách bằng Cryogel
  13. Tách dựa vào hạt có từ tính Magnetic activated cell sorting (MACS)
  14. Tách dựa vào hạt được kích hoạt huỳnh quang Flourescent activated cell sorting (FACS)
  15. Fluorescein IsoThioCyanate (FITC) excitation: 495nm emission: 521 nm (green) PhycoErythrin (PE) excitation: 495nm emission: 560 nm (Yellow)
  16. FACS Calibur
  17. FACS Jazz
  18. Tóm lược Chọn phương pháp phân tách tế bào phù hợp • Ứng dụng sau khi phân tách • Độ tinh sạch • Số lượng cần tách • Giá cả