Giáo trình Công nghệ Enzim (Phần 2) - Trần Xuân Ngạch

Enzim từ thực vật cũng chiếm một tỷ lệ thích đáng trong công nghệ sản xuất và sử dụng enzim nói chung Một số loại enzim đã được sử dụng nhiều trong và công nghiệp. Đặc biệt trong nghiên cứu khoa học người ta rất chú trọng chiết tách và xác định cơ chế tác dụng của các enzim trong các mô thực vật như nhóm enzim glycoxydaza, nhóm enzim oxy hoá khử polyphenoloxydaza (EPPO) đã mang lại những giá trị lý thuyết và thực tế rất cao trong thời gian gần đây.

4.1. Sản xuất ureaza từ đậu rựa:

Chỉ họ đậu Canavalia ở châu phi, ở Việt Nam có loài Canavalia enstfomis - được gọi là cây đậu rựa, đậu tấc; hạt dùng chữa bệnh tui han, nấc cụt, yếu thận. Trong hạt đậu rựa, hảm lượng treaza có thể đạt đến 20% chất khô do đó đay là nguồn nguyên liệu quan trọng để thu nhận ureaza.

- Về mặt ứng dụng: Lureaza được sử dụng trong y tế để xác định hàm lượng trên trong huyết, bảng quan có trong thành phần của thuốc chặng thận nhân tạo. Trong chế biến một số loại cá có mùi khai (đuối, nhám, mập) thì đừng ureaza để khử mùi khai rất hiệu quả. Ureaza có thể xúc tác thuỷ phân urê cả trong và ngoài tế bào (có thể).

(NH),CO +H.Oureaza 2NH3 + CO2

+ Chiết xuất lấy enzim:

Nghiền kỹ bột đậu trong dung dịch HCl 0,4% có thêm EDTA (trilon B, complexon III) 5.10^ M và L.cystein 5.10^ M. Sau đó ly tâm tách bã lấy dịch chiết.

+Xử lý nhiệt: Nâng nhiệt nhanh đến 60°C, giữ trong 30 phút đem ly tâm tách bỏ cặn kết tủa.

+ Siêu lọc: dịch ly tâm được lọc qua màng siêu lọc để loại bỏ peptit và polypeptit có trọng lượng phân tử bẻ (M>500)

+ Kết tủa bằng axeton:

Dịch lọc được xử lý bằng axeton lạnh (tỷ lệ 1:1), ly tâm tách kết tủa. Phần kết tủa đem hoà tan trong trisbuffet 0,1M pH=7 chứa EDTA và Lcystein 5 10 M

+Sắc ký trao đổi ion | Dịch enzim được chạy sắc ký trao đổi ion trên cột chứa DEAE-xenluloza với gradien nồng độ Na từ 0 – 1M Phân đoạn chứa enzim được sấy thăng hoa (đông khô) với chất sacaroza làm chất ổn định với tỷ lệ 25mg/1mg enzim

Chế phẩm thu được có hoạt tính tăng 25 lần so với ban đầu và hiệu suất thu hồi 43%.

Xem bảng 8 của giáo trình (trang 186). Một số thông số của quá trình thu nhận tureza từ đậu rựa.