Giá trị của kỹ thuật rt - pcr chẩn đoán virut dengue tại khoa cấp cứu, bệnh viện quân y 103 năm 2017

Nội dung text: Giá trị của kỹ thuật rt - pcr chẩn đoán virut dengue tại khoa cấp cứu, bệnh viện quân y 103 năm 2017

1. T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 GIÁ TR Ị CỦA K Ỹ THU ẬT RT-PCR CH ẨN ĐOÁN VIRUT DENGUE TẠI KHOA C ẤP C ỨU, B ỆNH VI ỆN QUÂN Y 103 N ĂM 2017 Nguy ễn Giang Hòa*; Lê Th ị B ảo Quyên**; Ngô Qúy Lâm*** Ph ạm V ăn Ti ến*; Hoàng Xuân S ử*** TÓM T ẮT Mục tiêu: đánh giá hi ệu qu ả c ủa k ỹ thu ật RT-PCR trong ch ẩn đoán virut Dengue (DENV) t ại Khoa C ấp c ứu, B ệnh vi ện Quân y 103 n ăm 2017. Đối t ượng và ph ươ ng pháp: 75 m ẫu huy ết thanh c ủa b ệnh nhân (BN) được ch ẩn đoán lâm sàng nghi nhi ễm dengue trong giai đoạn c ấp thu th ập t ại Khoa C ấp c ứu, Bệnh vi ện Quân y 103 tháng 8 - 9 n ăm 2017. Xét nghi ệm các m ẫu huy ết thanh phát hi ện NS1 Ag-IgM/IgG, s ử d ụng xét nghi ệm nhanh OnSite Duo Dengue Ag- IgG/IgM rapid test-CTK Biotech (Mỹ). K ỹ thu ật RT-PCR được t ối ưu để phát hi ện và gi ải trình t ự xác định týp DENV. Kết qu ả: trong s ố 75 BN nghi nhi ễm DENV xét nghi ệm b ằng test nhanh NS1-Ag, phát hi ện 50/75 BN (66,7%), xét nghi ệm b ằng RT-PCR phát hi ện được 52/75 BN (69,3%) nhi ễm DENV, trong đó 6/25 BN (24%) xét nghi ệm RT-PCR (+) nh ưng có xét nghi ệm NS1 (-). K ết h ợp các ch ỉ s ố xét nghi ệm, hi ệu qu ả ch ẩn đoán cao nh ất quan sát th ấy ở 59/75 BN (78,67%) khi có m ột trong b ốn ch ỉ tiêu xét nghi ệm RT-PCR ho ặc NS1-Ag ho ặc IgM ho ặc IgG d ươ ng tính. K ết qu ả xác định týp dengue cho th ấy 33/50 BN (66%) nhi ễm dengue týp I và 17/50 BN (34%) nhi ễm dengue týp II. Kết lu ận: k ỹ thu ật RT-PCR có giá tr ị và độ nh ạy cao trong ch ẩn đoán nhi ễm DENV, đặc bi ệt trong giai đoạn s ớm c ủa b ệnh khi các xét nghi ệm kháng nguyên NS1 và huy ết thanh h ọc IgM ho ặc IgG cho k ết qu ả âm tính. K ết h ợp RT-PCR v ới xét nghi ệm kháng nguyên NS1 và huy ết thanh h ọc cho hi ệu qu ả ch ẩn đoán cao h ơn khi s ử d ụng riêng r ẽ. RT-PCR còn s ử d ụng cho gi ải trình t ự gen xác định được 33/50 BN (66%) týp dengue I và 17/50 BN (34%) týp dengue II ph ục v ụ công tác giám sát và ki ểm soát d ịch dengue ở khu v ực Hà N ội. * T ừ khóa: Virut Dengue; K ỹ thu ật RT-PCR; NS1-Ag. Efficacy of RT-PCR Assay for Detecting Dengue Virus in Emergency Department, 103 Military Hospital Summary Objectives: To evaluate clinical performance of RT-PCR assay for detecting Dengue virus in acute febrile illness. Subjects and methods: A total of 75 sera samples collected from suspected patients infected with Dengue virus in Emergency Department of 103 Military Hospital. NS1 Ag-IgM/IgG tested using OnSite Duo Dengue Ag-IgG/IgM Rapid test-CTK Biotech, USA, whereas RT-PCR was optimized for detecting RNA and sequenced for typing of Dengue virus. Results: Among tested patients, RT-PCR positive was observed in 52/75 cases (69.33%), * B ệnh vi ện Quân y 103 ** Đại h ọc Khoa h ọc Tự nhiên, Đại h ọc Qu ốc gia Hà N ội *** Học vi ện Quân y Ng ười ph ản h ồi (Corresponding): Hoàng Xuân S ứ (hoangxuansu@vmmu.edu.vn) Ngày nh ận bài: 07/02/2018; Ngày ph ản bi ện đánh giá bài báo: 20/03/2018 Ngày bài báo được đă ng: 06/04/2018 62
2. t¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 whereas 50/75 cases (66.7%) were detected positive with NS1-Ag. Interestingly, among 25 cases negative with NS1Ag, 6 cases had RT-PCR positive. In combination with any two diagnostic assays, the best diagnostic performance was observed in 59/75 cases (78.67%) either one or in four tests with positive result. The study results detected 33/50 cases (66%) infected with dengue type I and 17/50 cases (34%) infected with dengue type II. Conclusion: This study indicated that RT-PCR is valuabe tool for early decteion of dengue virus infection. The combination of RT-PCR and NS1-Ag or serology IgM/IgG lead to high performance for diagnosis and monitoring dengue in emergency setting. RT-PCR used for sequencing to identify type dengue was observed in 33/50 cases (66%) infected with dengue type I and 17/50 cases (34%) were infected with dengue type II. This will help for surveilance and control of Dengue virus infection in Hanoi. * Keywords: Dengue virus; RT- PCR assay; NS1-Ag. ĐẶT V ẤN ĐỀ Ch ẩn đoán nhi ễm DENV hi ện nay ch ủ Bệnh s ốt dengue và s ốt xu ất huy ết yếu d ựa vào các xét nghi ệm test nhanh (SXHD) do DENV gây ra, lây truy ền qua nh ư dengue NS1-Ag (nonstructural protein mu ỗi đốt ( Aedes aegypti và Aedes albopictus) 1 antigen: NS1-Ag) dengue NS1 Ag + Ab là v ấn đề y t ế công c ộng mang tính toàn Combo và huy ết thanh h ọc MAC-ELISA. cầu, hi ện nay ước tính có kho ảng 390 Tuy nhiên, các xét nghi ệm này ch ỉ có độ tri ệu tr ường h ợp m ắc m ỗi n ăm ở 128 nh ạy 90% đố i v ới nhi ễm DENV l ần đầ u qu ốc gia thu ộc các khu v ực có khí h ậu hay nhi ễm DENV tiên phát, độ nh ạy gi ảm nhi ệt đới và c ận nhi ệt đới nh ư vùng Đông xu ống 50 - 80% khi nhi ễm DENV lần hai Nam Á, Tây Thái Bình D ươ ng, châu M ỹ, (hay nhi ễm dengue th ứ phát) [3, 4]. Do đó, và châu Phi [3]. để ch ẩn đoán chính xác nhi ễm DENV Tại Vi ệt Nam, d ịch b ệnh sốt dengue và trong giai đoạn s ớm c ủa b ệnh, k ỹ thu ật SXHD là b ệnh truy ền nhi ễm l ưu hành ph ổ RT-PCR v ới ưu điểm có độ nh ạy và độ bi ến kh ắp c ả n ước, trong đó Hà N ội là đặc hi ệu cao được nhi ều phòng xét khu v ực tr ọng điểm c ủa d ịch b ệnh trong nghi ệm ch ẩn đoán trên th ế gi ới s ử d ụng su ốt th ập k ỷ qua, v ới hàng ch ục nghìn để kh ẳng đị nh nhi ễm DENV, xác định các ng ười m ắc b ệnh hàng n ăm. Đặc bi ệt n ăm phân týp dengue [6, 7]. Ở Vi ệt Nam, RT- 2017, Hà N ội là n ơi có s ố ca m ắc cao PCR ch ưa được s ử d ụng th ường quy ở nh ất v ới > 20.0000 tr ường h ợp m ắc b ệnh các phòng xét nghi ệm để ch ẩn đoán s ớm và 7 tr ường h ợp t ử vong được báo cáo. nhi ễm DENV khi BN vào khoa khám c ấp Bệnh s ốt dengue và SXHD do DENV cứu. Chúng tôi ti ến hành nghiên c ứu này gây ra có 4 týp là 1, 2, 3 và 4. Ở Vi ệt Nam nh ằm m ục tiêu: Đánh giá hi ệu qu ả c ủa gặp c ả 4 týp, nh ưng g ặp ch ủ y ếu là týp 1 xét nghi ệm RT-PCR ch ẩn đoán DENV ở và 2. B ệnh có bi ểu hi ện lâm sàng đa d ạng, các khoa c ấp c ứu - nơi ti ếp nh ận nhi ều từ nhi ễm virut không tri ệu ch ứng đế n s ốt tr ường h ợp nghi nhi ễm DENV khi có v ụ dengue, SXHD và h ội ch ứng shock dengue. dịch bùng phát x ảy ra. 63
3. T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 ĐỐI T ƯỢNG VÀ PH ƯƠ NG PHÁP - K ỹ thu ật RT-PCR: NGHIÊN C ỨU + Tách chi ết ARN: tách chi ết ARN t ừ 1. Đối t ượng nghiên c ứu. 200 µl huy ết t ươ ng m ẫu b ệnh ph ẩm theo Nghiên c ứu th ực hi ện trên 75 m ẫu quy trình h ướng d ẫn c ủa nhà s ản xu ất huy ết thanh c ủa BN ở giai đoạn c ấp trong (High pure ARN viral kit, Roche, Th ụy S ỹ). dịch s ốt xu ất huy ết n ăm 2017 vào Khoa Hòa ARN trong 50 µl elution buffer và b ảo o khám C ấp c ứu, B ệnh vi ện Quân y 103. qu ản lâu dài ở -80 C. + RT-PCR: th ực hi ện onestep RT-PCR, 2. Ph ươ ng pháp nghiên c ứu. sử d ụng b ộ kít QIAGEN onestep RT-PCR Mô t ả phòng thí nghi ệm t ừ tháng 8 đến (Đức) v ới các c ặp m ồi do Lanciotti 9 - 2017 t ại Vi ện Nghiên c ứu Y D ược h ọc và CS công b ố. Trình t ự m ồi xuôi: Quân s ự, H ọc vi ện Quân y. Ch ẩn đoán 5‘-TCAATATGCTGAAACGCGCGAGAAA- lâm sàng BN s ốt dengue và SXHD theo CCG-3‘; m ồi ng ược: 5‘-TTGCACCAACAA- Hướng d ẫn c ủa B ộ Y t ế, g ồm: s ốt cao TCAATGTCTTCTGGTTC-3‘. Ch ạy ph ản đột ng ột, liên t ục 2 - 7 ngày và có ít nh ất ứng RT-PCR trên máy Master cycler 2 trong các d ấu hi ệu sau: PCR, Eppendorf ( Đức) v ới chu trình nhi ệt - Bi ểu hi ện xu ất huy ết: nghi ệm pháp của ph ản ứng bao g ồm: 50 oC/30 phút, dây th ắt d ươ ng tính, ch ấm xu ất huy ết ở 95 oC/15 phút, 35 chu k ỳ 94 oC/15 giây, dưới da, ch ảy máu chân r ăng ho ặc ch ảy 56 oC/30 giây, 72 oC/30 giây, 72 oC/10 phút máu cam. (4 oC, + ∞). S ản ph ẩm onestep RT-PCR - Nh ức đầu, chán ăn, bu ồn nôn. được ki ểm tra b ằng điện di trên gel agarose 1,2%, nhu ộm EtBr 30 phút và soi - Da xung huy ết, phát ban. UV để ki ểm tra kích th ước s ản ph ẩm là Thu th ập m ẫu huy ết t ươ ng: l ấy 5 ml 511 bp. Tinh s ạch s ản ph ẩm PCR và máu t ĩnh m ạch ngo ại vi c ủa BN vào ống gi ải trình t ự gen để xác định týp dengue ch ứa ch ất ch ống đông EDTA-K3, sau đó bằng phân tích loài, s ử d ụng ph ần m ềm ly tâm 3.000 vòng/phút trong 10 phút, thu MEGA 7.0. huy ết t ươ ng làm xét nghi ệm test nhanh + Ch ứng d ươ ng ARN: ch ứng d ươ ng ho ặc b ảo qu ản ở -80 0C cho t ới khi xét ARN c ủa DENV được t ổng h ợp in vitro , nghiệm RT-PCR. sau đó tinh s ạch và đo n ồng độ s ử d ụng * K ỹ thu ật s ử d ụng trong nghiên c ứu: Nanodrop (Thermoscientific, M ỹ) 657,3 ng/ µl, - Xét nghi ệm ch ẩn đoán nhanh: phát chuy ển đổi thành s ố b ản copy d ựa theo hi ện đồng th ời và phân bi ệt kháng th ể hệ s ố Avogadro và kích th ước s ản ph ẩm IgM, kháng th ể IgG kháng DENV và tươ ng ứng v ới 2.192 × 10 12 copies// µl. kháng nguyên DENV-NS1 trong máu toàn Từ dung dịch ARN ban đầu, ti ến hành ph ần, huy ết thanh ho ặc huy ết t ươ ng c ủa pha loãng trong dung d ịch TE t ới n ồng độ ng ười s ử d ụng kít OnSite Duo Dengue 10 4 copies/ml s ử d ụng làm đối ch ứng d ươ ng Ag-IgG/IgM rapid test-CTK Biotech (M ỹ). trong ph ản ứng onestep RT-PCR. 64
4. t¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 * Phân tích s ố li ệu: thông tin BN và k ết qu ả xét nghi ệm được mã hóa và nh ập li ệu bằng ph ần m ềm Excel. Phân tích s ố li ệu s ử d ụng ph ần m ềm SPSS 13.0. Tính t ỷ l ệ, so sánh t ừng c ặp s ử d ụng ki ểm định χ2 ho ặc Fisher đối v ới bi ến định tính và ki ểm định t-student test và Mann-Whitney U test đối v ới bi ến định l ượng. p < 0,05 được coi có ý ngh ĩa th ống kê. KẾT QU Ả NGHIÊN C ỨU VÀ BÀN LU ẬN Bảng 1: Thông tin chung c ủa nhóm BN nghiên c ứu. Thông s ố n Tu ổi trung bình 32,84 ± 13,83 Gi ới (nam/n ữ) 34/41 Sốt 74/75 (98,66%) Ban xu ất huy ết 22/75 (29,33%) Bạch c ầu < 4,5 × 10 3/µl 37/75 (49,33%) Ti ểu c ầu < 100 × 10 3/µl 22/75 (29,33%) Trong 75 BN nghi nhi ễm DENV được đư a vào nghiên c ứu g ồm 34 nam và 41 n ữ, độ tu ổi trung bình c ủa BN 32,84. H ầu h ết BN có bi ểu hi ện s ốt: 74/75 BN (98,66%), 22/75 BN (29,33%) xu ất hi ện ban xu ất huy ết, k ết qu ả xét nghi ệm cho th ấy gi ảm ti ểu cầu < 100 × 10 3/µl g ặp 22/75 BN (29,33%) và gi ảm b ạch c ầu < 4,5 x 10 3/µl g ặp 37/75 BN (29,33%). Bảng 2: So sánh xét nghi ệm nhanh NS1-Ag và RT-PCR ch ẩn đoán dengue . RT-PCR NS1-Ag Tổng (n = 52) (n = 23) (n = 50) 46 4 50/75 (66,7%) (n = 25) 6 19 25/75 (33,33%) Tổng 52/75 (69,3%) 23 (30,66%) Kết qu ả xét nghi ệm kh ẳng định nhi ễm DENV b ằng xét nghi ệm nhanh NS1-Ag phát hi ện 50/75 BN (66,7%), trong đó xét nghi ệm b ằng RT-PCR phát hi ện 52/75 BN (69,3%) nhi ễm DENV. K ết qu ả này t ươ ng t ự nghiên c ứu c ủa Anand và CS, Huang và CS v ới t ỷ l ệ l ần l ượt 68,1% và 71,94% [8, 9]. Đặc bi ệt, trong s ố 25 BN xét nghi ệm âm tính v ới NS1-Ag, phát hi ện 6/25 BN (24%) d ươ ng tính v ới RT-PCR, trong khi nghiên cứu c ủa Anand ch ỉ phát hi ện 2/18 BN (11,11%), Huang và CS phát hi ện 51/392 BN (13,01%). Do đó, n ếu ch ỉ s ử d ụng xét nghi ệm nhanh NS1-Ag s ẽ b ỏ sót đáng k ể BN nhi ễm DENV trong giai đoạn c ấp. N ếu xem RT-PCR nh ư tiêu chu ẩn vàng ch ẩn đoán nhi ễm DENV, xét nghi ệm nhanh NS1-Ag có độ nh ạy 88,5% và độ đặc hi ệu 82,6%. 65
5. T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 500 bp 511 bp Hình 1: Đ ệ ả ẩ i n di s n ph m RT-PCR trên gel agarose 1,2%. (M: Marker 100 bp, 1: Đối ch ứng âm, 2: Đối ch ứng d ươ ng, 3 - 11: Các m ẫu b ệnh ph ẩm) Khi so sánh giá tr ị c ủa hai xét nghi ệm s ử d ụng trong ch ẩn đoán nhi ễm DENV theo th ời gian xu ất hi ện tri ệu ch ứng s ốt, xét nghi ệm RT-PCR có t ỷ l ệ phát hi ện d ươ ng tính trong ba ngày đầu (23/31 BN = 74,19%), cao h ơn so v ới xét nghi ệm nhanh NS1 (18/31 BN = 58,06%), tuy nhiên s ự khác bi ệt không có ý ngh ĩa th ống kê (p > 0,05). Trong nhi ễm DENV, có th ể kháng nguyên NS1 được phát hi ện ngay t ừ ngày đầu tiên sốt, có th ể kéo dài đến ngày th ứ 9, trong khi đó t ải l ượng c ủa DENV trong máu có th ể phát hi ện 1 - 2 ngày tr ước khi xu ất hi ện tri ệu ch ứng s ốt. Do đó, trong giai đoạn s ớm của nhi ễm dengue, xét nghi ệm RT-PCR có vai trò quan tr ọng trong ch ẩn đoán s ớm nhi ễm dengue, có giá tr ị giúp công tác giám sát và ki ểm soát d ịch khi các xét nghi ệm khác và bi ểu hi ện lâm sàng ch ưa giúp ch ẩn đoán dengue. Ch ẩn đoán nhi ễm DENV khi một trong s ố các xét nghi ệm RT-PCR ho ặc realtime RT-PCR, NS1-Ag, phân l ập virut, chuy ển đảo huy ết thanh IgM, chuy ển đảo huy ết thanh IgG d ươ ng tính [10]. Bảng 3: Giá tr ị ch ẩn đoán c ủa xét nghi ệm ch ẩn đoán dengue theo th ời gian s ốt. Th ời gian s ốt Tổng (n = 75) , Chỉ số n (%) < 3 ngày (n = 31) 4 - 9 ngày (n = 44) 50 (66,66%) n (%) n (%) NS1 (+) 18 (58,06%) 32 (72,72%) 52 (69,33%) PCR (+) 23 (74,19%) 29 (65,90%) 28 (37,33%) IgM/IgG (+) 11 (35,48%) 17 (38,63%) 46 (61,33%) PCR (+), NS1 (+) 17 (54,84%) 29 (65,90%) 56 (74,67%) PCR (+) ho ặc NS1 (+) 24 (77,42%) 32 (72,72%) 55 (73,33%) PCR (+) ho ặc IgM (+) 24 (77,42%) 31 (70,45%) 47 (62,66%) 66
6. t¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 PCR (+) ho ặc IgG/IgM (+) 24 (77,42%) 23 (52,27%) 50 (66,66%) NS1 (+) ho ặc IgG/IgM (+) 18 (58,06%) 32 (72,72%) 51 (68%) NS1 (+) ho ặc IgM (+) 30 (96,77%) 21 (47,73%) 56 (74,67%) PCR (+) ho ặc NS1 (+) ho ặc IgM (+) 24 (77,42%) 32 (72,72%) 59 (78,67%) PCR (+) ho ặc NS1 (+) ho ặc IgM (+) 24 (77,42%) 35 (79,54%) 30 (40%) ho ặc IgG (+) PCR (+), NS1 (+), IgM (+) 10 (32,26%) 20 (50,00%) 27 (36%) PCR (+), IgG/IgM (+), NS1 (+) 10 (32,26%) 17 (38,64%) 15 (20%) PCR (+), IgG/IgM (-), NS1 (+) 7 (22,58%) 8 (18,18%) 4 (5,33%) PCR (+), IgG/IgM (-), NS1 (-) 4 (12,90%) 0 (0%) 0 (0%) PCR (+), IgG/IgM (+), NS1 (-) 0 (0%) 0 (0%) 1 (1,33%) PCR (-), IgG/IgM (+), NS1 (+) 1 (3,23%) 0 (0%) 1 (1,33%) PCR (-), IgG/IgM (-), NS1 (+) 0 (0%) 1 (2,27%) 0 (0%) PCR (-), IgG/IgM (+), NS1 (-) 0 (0%) 0 (0%) p > 0,05 Chúng tôi k ết h ợp các xét nghi ệm NS-Ag, RT-PCR, huy ết thanh h ọc IgM và IgG để đánh giá hi ệu qu ả ch ẩn đoán nhi ễm DENV. Không có sự khác bi ệt có ý ngh ĩa th ống kê về ch ỉ s ố xét nghi ệm gi ữa các nhóm theo th ời gian s ốt (p > 0,05). T ỷ l ệ ch ẩn đoán cao nh ất khi có 4 ch ỉ s ố xét nghi ệm cho k ết qu ả d ươ ng tính (59/75 BN = 78,67%). Đặc bi ệt, khi k ết h ợp v ới xét nghi ệm huy ết thanh h ọc IgM và IgG, hi ệu qu ả ch ẩn đoán gi ảm d ần theo t ừng t ổ h ợp xét nghi ệm. Khi k ết h ợp c ả RT-PCR (+) và NS1-Ag (+), 46/75 BN (61,33%) được ch ẩn đoán dengue. Điều này có th ể gi ải thích, ở giai đoạn sau kh ởi phát s ốt, l ượng DENV trong máu gi ảm, ti ếp theo là IgM và IgG xu ất hi ện d ẫn đến làm gi ảm c ả NS1-Ag do g ắn v ới kháng th ể t ạo ph ức h ợp mi ễn d ịch. Điểm đáng chú ý trong nghiên c ứu này, chúng tôi phát hi ện 4/31 BN (12,90%) có k ết qu ả RT-PCR d ươ ng tính ở BN có c ả 2 xét nghi ệm NS1-Ag và IgM/IgG âm tính trong giai đoạn c ấp v ới th ời gian sốt < 3 ngày. K ết qu ả này th ấp h ơn nghiên c ứu c ủa Huang và CS (2013) ở Đài Loan (12,90% so v ới 21,05% [9]. Nh ư v ậy, khi s ử d ụng RT-PCR s ẽ giúp ch ẩn đoán s ớm dengue trong giai đoạn c ấp c ủa b ệnh. RT-PCR còn giúp xác định týp c ủa DENV giúp theo dõi tiên l ượng điều tr ị c ũng nh ư giám sát d ịch t ễ h ọc. Trong nghiên c ứu này, 50 m ẫu d ươ ng tính v ới DENV b ằng RT-PCR được gi ải trình t ự xác định týp dengue. 67
7. T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 4-2018 * T ỷ l ệ týp dengue trong nhóm nghiên Tạp chí Phòng chống B ệnh Sốt rét và các cứu: bệnh Ký sinh trùng. 2013, 4, tr.67-74. 2. Lê Th ị Ngân . Nghiên c ứu ch ẩn đoán s ốt Týp dengue n % dengue/s ốt xu ất huy ết dengue b ằng k ỹ thu ật Týp I 33 66 % PCR và huy ết thanh h ọc t ại B ệnh vi ện B ạch Mai t ừ tháng 01- 2006 đến 06 - 2007. Lu ận Týp II 17 34% văn Th ạc s ỹ. Tr ường Đại h ọc Y Hà N ội. 2007. Týp III 0 0% 3. Guzman M.G, Harris E . Dengue. Lancet. Týp IV 0 0% Lond Engl. 2015, Jan, 31, 385 (9966), pp.453-65. Tổng 50 100% 4. Simmons CP, Farrar J.J, Nguyen van V.C, Wills B. Dengue. N Engl J Med. 2012, Apr 12, Týp I và II dengue l ưu hành ph ổ bi ến 366 (15), pp.1423-1432. tại mi ền B ắc Vi ệt Nam [2]. 5. Dengue : Guidelines for diagnosis, treatment, prevention and control: New Edition - KẾT LU ẬN PubMed - NCBI [Internet]. [cited 2018 Jan 23]. Kết qu ả nghiên c ứu chúng tôi cho Available from: th ấy RT-PCR là ph ươ ng pháp có giá tr ị pubmed/23762963 trong ch ẩn đoán dengue ở Khoa C ấp c ứu, 6. Muller D.A, Depelsenaire ACI, Young Bệnh vi ện Quân y 103 v ới độ nh ạy 69,33%. P.R. Clinical and laboratory diagnosis of Khi s ử d ụng k ết h ợp RT-PCR v ới xét Dengue virus infection. J Infect Dis. 2017, nghi ệm nhanh NS1-Ag-IgM/IgG làm t ăng Mar 1, 215 (suppl_2), S.89-95. hi ệu qu ả ch ẩn đoán dengue lên 78,67% 7. Peeling R.W, Artsob H, Pelegrino J.L, so v ới s ử d ụng riêng l ẻ t ừng xét nghi ệm, Buchy P, Cardosa M.J, Devi S et al . RT-PCR phát hi ện thêm 4/31 BN d ươ ng Evaluation of diagnostic tests: dengue. Nat tính có xét nghi ệm NS1 và IgM/IgG âm tính Rev Microbiol. 2010, 8 (12 suppl), S.30-38. ở giai đoạn c ấp c ủa b ệnh. 8. Anand AM, Sistla S, Dhodapkar R, Hamide A, Biswal N, Srinivasan B . Evaluation Lời cảm ơn: nghiên c ứu được h ỗ tr ợ of NS1 antigen detection for early diagnosis of của ch ươ ng trình h ợp tác, nghiên c ứu v ề Dengue in a tertiary Hospital in Southern các c ăn nguyên gây s ốt xu ất huy ết v ới India. J Clin Diagn Res JCDR. 2016, Apr; 10 (4), GS. Jonas Schmidt Chanasit, Vi ện Y h ọc DC01-04. Nhi ệt đới Bernhard Nocht, Hamburg, Đức, 9. Huang C.H, Kuo L.L, Yang K.D, Lin P.S, Trung tâm h ợp tác và tham chi ếu c ủa Lu P.L, Lin C.C et al. Laboratory diagnostics Tổ ch ức Y t ế Th ế gi ới v ề nghiên cứu virut of dengue fever: an emphasis on the role of sốt xu ất huy ết. commercial dengue virus nonstructural protein 1 antigen rapid test. J Microbiol Immunol TÀI LI ỆU THAM KH ẢO Infect. Wei Mian Yu Gan Ran Za Zhi. 2013, 1. Lê Trung Kiên, Tr ầnThanh D ươ ng và CS . Oct, 46 (5), pp.358-365. So sánh s ố ca m ắc và t ử vong do s ốt xu ất 10. Guzman M.G, Gubler D.J, Izquierdo A, huy ết dengue t ại Vi ệt Nam n ăm 2011 và 2012 Martinez E, Halstead S.B. Dengue infection. so sánh v ới trung bình 5 n ăm 2006 - 2010. Nat Rev Dis Primer. 2016, 18 (2),16055. 68